紫外可見分光光度計是根據(jù)物質分子對波長為200~760nm的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結構分析儀器。操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好。波長長的光線能量小,波長短的光線能量大。
紫外可見分光光度計測量是關于物質分子對不同波長和特定波長處的輻射吸收程度的測量。物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
基本結構:
紫外可見分光光度計主要由電光系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個部分組成。
1、電光系統(tǒng):主要由氘燈、鎢燈和相應的電源組成。電光系統(tǒng)對整機的穩(wěn)定性有很大的影響,是儀器不穩(wěn)定的主要原因之一。
2、光學系統(tǒng):包括外光路系統(tǒng)(轉向平面鏡、聚光鏡)、單色器兩個主要部分;其中,外光路和單色器各有很多類型。單色器是紫外可見分光光度計雜散光的主要來源,是整機使用時,主要分析誤差的來源之一。
3、光電系統(tǒng):是將光信號變?yōu)殡娦盘柕年P鍵部件,直接影響儀器的靈敏度和適用范圍;一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
4、電子系統(tǒng):主要由放大器、A/D變換器等組成;其中的放大器,也是影響整機靈敏度、穩(wěn)定性的主要部件。它又是儀器噪聲的主要來源部件,直接影響本產(chǎn)品的分析誤差。
5、數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng):是決定整機的自動化程度的關鍵部件;特別是軟件部分,直接影響本產(chǎn)品的質量。
使用注意事項:
1、使用紫外可見分光光度計的人員,一般來說,一定要詳細閱讀儀器安全操作手冊,否則嚴禁操作儀器。準備操作儀器前,需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下,表面指針是否指向零刻度。如若不是,理應先調零然后才能連接電源。在使用的過程中,操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰,放大器使用過后,一定需要把檔位歸置到零。
2、除此之外,在操作時,操作人員需要留意一下機器的干燥劑,因為這是非常重要的。通常情況下,干燥劑有效時,儀器的工作是不會出現(xiàn)任何問題的??墒钱敻稍飫┦е?,所出現(xiàn)的問題是非常嚴重的。除了儀器上面顯數(shù)不準之外,很容易使反射鏡變得污穢,從而使得光線率不準確。因此,日常使用儀器時,一定要注意干燥是否有效。當發(fā)現(xiàn)失效后,要及時進行更換。
3、產(chǎn)品在開機前將樣品室內的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
4、比色皿內溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔,池壁上液滴應用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
5、實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內,蓋上防塵罩,做好使用登記。